这个并不是溶菌酶的问题,有的裂解液是很难直接破菌的。 你可以试试NOVAGEN的bugbuster裂解液,如果自己摸索条件的话,可以考虑其他因素的影响,建议添加EDTA、去垢剂(非离子 …
每次收集200ml菌液的菌体,然后加入20ml的裂解液(无溶菌酶),超声破碎,冰浴,功率300w,工作3秒,间歇3,但是破碎时间长达40-50min,离心后沉淀中出现黑色的东西。 1:超 …
2019年7月10日 · 看完上面的介绍之后,大家搞明白生物溶菌酶有什么用了吗?最后温馨提醒大家一下,一个小小的细菌可以引发起一系列的胃病,因此大家千万不要小看口腔健康,它很有可 …
2.把配制好的10 mg/ml的溶菌酶加入,要求终浓度为1mg/ml。 3.冰上放置30分钟。 4.再加入tritonx-100、Dnase、Rnase。温育十分钟。 5.离心,取上清和沉淀跑电泳鉴别。 注意:我是 …
咱们实验室做阳性菌RNA提取是用研磨加Trizol,阴性菌是用巯基乙醇、溶菌酶柱提,那么用Trizol直接提阴性菌可以吗?提阳性菌加巯基乙醇和溶菌酶不研磨可以吗?有没有阴性、阳性 …
(溶菌酶在这个pH范围内比较好发挥作用) 但我个人的经验是:如果你裂解细菌是为了提取蛋白的话,而且蛋白的分子量又小于20kd的话,尽量减少溶菌酶的用量,会引入溶菌酶这种杂蛋白.一般 …
溶菌酶、超声共同破碎细菌时,PMSF该与溶菌酶同时加入呢还是30min后超声前加入?同时加入会不会抑制溶菌酶活性?30min后再加会不会再溶菌过程中造成目的蛋白降解?
给个tiangen的一个kit上的配法吧:20mM Tris,pH8.0;2mM Na2-EDTA;1.2%Triton;终浓度为20mg/ml 溶菌酶。 收集适量菌体,180ul 上述溶液,37度, >30min 2008-05-06 IP 北京 北京
在液氮中突然冷冻细胞。用含有蛋白酶抑制剂的PBS缓冲液悬浮沉淀。用100 µg/ml溶菌酶处理并在冰上孵育15 min。加上10% N-laurylsarcosine (终浓度1.5%),然后超声波破碎。16000 …
作了5管,加溶菌酶后,3管400w,5s,5s,30分钟就变澄清了,可是有两管超了1个小时了(菌好像稍多一些),只是比之前清了些,但仍很混浊。不知道破碎成功没。做了镜检,没太看出区 …